与以往谍战剧间谍各为其主、混战终见分晓不同，《虎穴锄奸》以共产党铲除叛徒内奸这一特殊角度展开剧情，于震领衔饰演的肖一鸣是中共特科具体负责人兼红队队长，是中共安插在上海滩白区的高层特工，他文武兼备，是难得的情报中坚。但正是这个掌握众多中共机密的“ 第一特工”，却叛变沦为“ 最危险的叛徒”。

肖一鸣的原型是原中共中央特科负责人顾顺章，是我党历史上最危险的叛徒。在他的破坏下，蔡和森、恽代英等中共志士均惨遭杀害……